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  • 第124期病毒、疫苗純化的最佳選擇——QuikSep Sulfate

    2019年10月22日來源:管理員
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    在生物技術領域,常使用親和色譜法進行病毒、蛋白的純化。親和色譜法屬于吸附色譜法的一種,目標物質有選擇地吸附于色譜柱填料的配體上,然后通過更改緩沖液達到分離、回收的目的。使用親和色譜法回收目標成分,可以比凝膠過濾或離子交換色譜法的精度高出很多。

    QuikSep Sulfate是一種特定的親和填料,適用于部分病毒、病毒樣顆粒以及某些特定的抗原和蛋白(見表2)的分離純化。

    特點:

    1.?????? 快速、簡單(一步純化)。

    2.?????? 載量高。

    3.?????? 易于放大。

    1:性能參數

    介質

    QuikSep Sulfate

    基質

    高剛性瓊脂糖

    粒徑范圍

    45-165μm

    平均粒徑

    90μm

    溶菌酶載量

    ≥3mg/ml 介質

    pH穩定性

    5-12(長期) 5-12(短期)

    操作壓力

    ≤0.3MPa

    流速

    16mm× 300mm,0.1MPa300cm/h

    貯存溶液

    20%乙醇

    貯存溫度

    4-30

    ?

    2QuikSep Sulfate適用性

    Viruses

    Viral/Microbial Agents

    Rabies

    Influenza ?

    Japanese ? Enchephalitis

    Feline ? Leukemia

    Feline ? Herpes

    Feline ? Calicivirus

    Respiratory ? Syncytial Virus

    Human ? Herpes Simplex

    Human ? Measles

    Human ? Parainfluenza

    Herpes ? Simplex gA and gB Glycoprotein Subunits

    Hepatitis ? B Surface Antigen

    Filamentous ? Hemagglutinin from B. pertussis

    Leucocytosis ? Promoting Factor Hemagglutinin

    ?

    ?

    QuikSep Sulfate純化狂犬病毒層析工藝

    ?

    1. 層析柱

    介質:QuikSep Sulfate; 規格:1ml 預裝柱

    ?

    2. 樣品預處理

    高倍濃縮后的樣品用平衡液稀釋 20 倍,上樣前 0.45um 過濾,0.45um 過濾。

    ?

    3. 緩沖液

    A10mM PB,pH 7.2; B10mM PB,1M NaCl,pH 7.2。

    備注:所有溶液需 0.45um 過濾。

    ?

    4. 純化過程

    流速:1ml/min 或者 30cm/h;

    平衡:溶液 A 平衡 10CVCV 指柱體積,下同);

    上樣:上樣 30CV;

    清洗:溶液 A 平衡 10CV;

    洗脫:溶液 B 洗脫 10CV,收集洗脫液。

    ?

    5. 純化圖譜

    ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?QQ截圖20191022082740.jpg


    5. 檢測結果


    體積

    ml

    蛋白濃度

    ug/ml

    抗原含量

    IU/ml

    蛋白去除率

    %

    收率

    %

    濃縮倍數

    純化倍數

    原液

    30

    615

    1.51

    94

    75.4

    11

    13

    流穿液

    30

    557

    0.22

    洗脫液

    2

    531

    17.08

    ?

    7. 結論

    該懸浮培養狂犬病毒純化工藝中,病毒與 QuikSep Sulfate進行吸附結合,洗脫液中蛋白去除率≈94%,回收率≈75.4% 。

    8. 訂購信息

    產品

    規格(ml)

    貨號

    QuikSep Sulfate

    25

    HZ1010-1

    QuikSep Sulfate

    100

    HZ1010-1

    QuikSep Sulfate

    500

    HZ1010-1

    QuikSep Sulfate

    1000

    HZ1010-1


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