正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)，以及其它具有極性官能團，如氨基(NH2、APS)和氰基(CN)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其它基團的極性較強，因此，分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小，即極性弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低，如：正乙烷(Hexane)，氯仿(Chloroform)，二氯甲烷(Methylene Chloride)等。